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技術(shù)文章

什么是支撐膜?

什么是支撐膜?

在電子顯微鏡中,支撐膜是將要觀察的樣品固定在稱為網(wǎng)格的圓盤上的薄膜。
在光學(xué)顯微鏡中,有玻璃載玻片,其上將要觀察的部分放置在透明玻璃上,但在電子顯微鏡的情況下,有一個(gè)網(wǎng)格,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)在直徑為3毫米的圓盤上鉆孔,并且具有支撐部分的功能與光學(xué)顯微鏡中的載玻片相同。

TEM網(wǎng)格支撐膜
< 支撐膜>的簡(jiǎn)要圖像

當(dāng)使用電子顯微鏡將樣品放置在具有薄孔的銅板上進(jìn)行觀察時(shí),支持膜開始應(yīng)用于包括醫(yī)學(xué)在內(nèi)的生物領(lǐng)域。 由于這個(gè)時(shí)代使用的嵌入樹脂是甲基丙烯酸酯樹脂,因此必須使用支撐膜來支撐切片,因?yàn)樗鼫p少了觀察過程中電子束造成的損壞。 支撐膜相當(dāng)于光學(xué)顯微鏡中的載玻片,用于支撐小顆粒樣品或支撐超薄切片。

通過使用具有相對(duì)穩(wěn)定電子束的環(huán)氧樹脂進(jìn)行嵌入,大多數(shù)正常切片被放置在小于150目網(wǎng)格上。
支撐膜的材料是碳,各種塑料,等離子聚合膜等,每種都有其優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn),因此有必要選擇合適的一種進(jìn)行觀察。
本節(jié)說明如何制作支撐膜,如何根據(jù)使用目的選擇支撐膜制備材料,如何制作各種支撐膜,以及如何將支撐膜用于樣品支撐目的以外的目的。

什么需要支撐膜

用玻璃刀或金剛石刀切割樹脂包埋的組織,并作為薄片直接放置在網(wǎng)格上。 由于小粉末和微生物不能直接放置在網(wǎng)格上,因此在網(wǎng)格上形成塑料或碳薄膜,并將目標(biāo)樣品放置在網(wǎng)格上進(jìn)行觀察。

使用100、75、50、單孔和狹縫網(wǎng)格的大開口來觀察大面積區(qū)域,并準(zhǔn)備帶有支撐膜的網(wǎng)格并在其上放置切片進(jìn)行觀察。 理想情況下,您不希望使用支撐膜來觀察切片(因?yàn)樵肼暎?,但這是寬視場(chǎng)和低放大倍率觀察的必要方法。

當(dāng)快速冷凍組織以形成超薄切片時(shí),無論網(wǎng)格的孔直徑如何,都需要支撐膜。 還需要進(jìn)行負(fù)染色,陰影投射方法。

將那些需要支撐膜的人聚集在一起。

  1. 執(zhí)行負(fù)染色和陰影投射方法時(shí)。

  2. 在狹縫網(wǎng)格上放置連續(xù)截面時(shí)。

  3. 當(dāng)需要將切屑放在具有大開口(孔直徑)的網(wǎng)格上時(shí)。

  4. 當(dāng)使用對(duì)電子束不穩(wěn)定的樹脂進(jìn)行包埋時(shí)。

  5. 您希望用較小的切割表面觀察整個(gè)樣品。

  6. 當(dāng)需要觀察極薄的切片時(shí)。

  7. 放置小樣品時(shí)。 (粉末、復(fù)制膜等)。

  8. 觀察冷凍復(fù)制膜時(shí)。

  9. 在網(wǎng)格上放置基于冷凍切片機(jī)的切片時(shí)。


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